細胞生理生化檢測指標

細胞生理生化檢測指標是評估細胞功能狀態和病理變化的重要依據，涵蓋代謝活性、膜完整性、酶活性、氧化應激等多個維度。以下為常見檢測指標及其意義：### 1. **代謝活性檢測**通過MTT、CCK-8或ATP檢測反映細胞能量代謝水平。MTT法基于線粒體脫氫酶將黃色四唑鹽還原為紫色結晶，間接反映活細胞數量；CCK-8則利用水溶性四唑鹽生成橙色甲瓚，靈敏度更高。ATP檢測通過熒光素酶系統定量細胞內ATP濃度，直接反映能量代謝狀態。這些指標廣泛應用于藥物毒性測試和細胞增殖分析。### 2. **膜完整性評估**乳酸脫氫酶（LDH）釋放試驗和臺盼藍染色是常用方法。細胞膜受損時，LDH外泄至培養液，通過檢測酶活性可量化損傷程度；臺盼藍因無法穿透完整膜結構，僅死細胞被染色，常用于細胞存活率統計。### 3. **酶活性分析**包括ATP酶、線粒體呼吸鏈復合體（如細胞色素C氧化酶）、Caspase家族蛋白酶等。線粒體酶活性下降提示能量代謝障礙，Caspase-3/7激活是細胞凋亡的關鍵標志。檢測多采用ELISA、熒光底物法或比色法。### 4. **氧化應激指標**活性氧（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）等反映氧化-抗氧化平衡。DCFH-DA探針可熒光標記ROS，TBA法檢測丙二醛（MDA）評估脂質過氧化水平。這些指標在神經退行性疾病、缺血再灌注損傷研究中尤為重要。### 5. **增殖與凋亡檢測**BrdU/EdU摻入法通過標記新合成DNA檢測增殖，流式細胞術分析細胞周期分布（PI染色）或凋亡率（Annexin V/PI雙染）。線粒體膜電位（JC-1探針）變化、DNA ladder現象也是凋亡特征。### 6. **信號轉導與基因表達**Western blot檢測關鍵蛋白（如p53、Bcl-2家族）表達及磷酸化狀態，qPCR或RNA-seq分析基因表達譜，鈣離子熒光探針（如Fluo-4）監測胞內Ca2?動態變化。### **臨床應用**在腫瘤藥敏試驗中，聯合代謝活性和凋亡指標可評估化療藥物療效；心血管研究中，LDH與ROS檢測能揭示心肌缺血損傷機制；免疫學研究則通過細胞因子（IL-6、TNF-α）分泌水平評估免疫細胞功能。這些指標需根據實驗目的進行組合分析，結合形態學觀察（如電鏡）和功能學檢測（如氧消耗率），才能全面解析細胞生理狀態。標準化操作與設立陰性/陽性對照是確保數據可靠性的關鍵。