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洋蔥亞細胞定位 如何定位重要細胞器 亞細胞定位辦法就是用來肯定細胞內分子在細胞中的位置的一種辦法。如何使用熒光顯微鏡技術來定位洋蔥細胞中的一些重要細胞器。
植物細胞是由許多不同的細胞器組成的，這些細胞器在細胞內扮演著不同的角色。為了研究這些細胞器的功能和位置，蛋白互作，科學家們使用各種技術來對它們進行定位。其中一種常用的技術是熒光顯微鏡技術，它可以通過標記特定的蛋白質或化合物來觀察它們在細胞內的位置。
禾谷菌 CgRab5A 的亞細胞定位研究：劉涵等人利用多片段一步法將 CgRab5A 自身啟動子、GFP 片段和 CgRab5A 開放閱讀框（ORF）片段到 pKNT 載體上，轉化型禾谷菌的原生質體后，通過共聚焦顯微鏡觀察 GFP-CgRab5A 在菌絲和孢子內的定位情況。結果表明，GFP-CgRab5A 在菌絲和孢子細胞內均呈點狀分布，定位于早期內涵體上。
水稻 OsUF 的亞細胞定位：丁作美等人通過得到水稻 E3 泛素連接酶 — 泛素融合蛋白（OsUF）基因的 cDNA 序列，并利用 Gateway 同源重組體系將 OsUF cDNA 全長重組到融合表達綠色熒光蛋白（GFP）的表達載體上，通過農桿菌介導的煙草瞬時表達系統進行亞細胞定位。結果顯示，OsUF 蛋白定位在細胞核。
為什么不先對一個基因做預測，在預測的結果上直接做共定位？
不同的預測網站有不同的計算方法，同一個基因在不同的預測網站也可能得出不同的定位結果。另外所有的結果都應是基于實驗得到的，對于不清楚可能定位在哪里的基因，一般推薦先做普通定位，根據普通定位的結果再決定做哪種細胞器的共定位。
為什么有的基因做原生質體轉化時熒光蛋白不亮？
不同物種的細胞可能對基因表達有影響，當在一種材料的原生質體中觀察不到熒光時，可以考慮換一種受體材料。另外，如果是分泌蛋白，在原生質體中無法觀察到熒光，此時可以考慮注射葉片來觀察熒光。
拍攝時為什么有明場通道？
（1）顯示細胞狀態，有活力的原生質體細胞應該是飽滿圓潤的，變形或破碎的細胞說明此時細胞不是適狀態或細胞已。
（2）顯示熒光確實是細胞內蛋白表達的，而不是細胞碎片及雜質產生的雜光。
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