湖北熒光原位雜交-貝科新肽
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武漢貝科新肽科技有限公司
- 主營業務:原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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- 公司地址:湖北省武漢市洪山區關山大道289號紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號
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(夏先生 先生)
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FISH技術的基本步驟包括探針制備、樣品預處理、探針與樣品的雜交、信號檢測和圖像分析等。在探針制備過程中,使用熒光標記物代替同位素標記物來標記探針。在樣品預處理過程中,細胞或組織的固定、裂解和去除非特異性蛋白質等操作都是必要的,以提高探針與目標序列的親和力和特異性。在探針與樣品的雜交過程中,探針與樣品中的目標序列進行互補性雜交,形成可檢測的熒光信號。在信號檢測和圖像分析過程中,使用高靈敏度熒光顯微鏡檢測熒光信號并獲取高分辨率的細胞圖像。

①細胞特異性mRNA轉錄的定位,可用于基因圖譜,熒光原位雜交,基因表達和基因組進化的研究;②組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位,如EB病毒mRNA、人類狀瘤病毒和巨細胞病毒DNA的檢測;③癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉錄水平的表達及其變化的檢測;④基因在染色體上的定位;⑤檢測染色體的變化,如染色體數量異常和染色體易位等;⑥分裂間期細胞遺傳學的研究,如遺傳病的產前診斷和某些遺傳病基因攜帶者的確定,某些的診斷和生物學劑量測定等。

這一原理對于檢測一個特異的mRNA在某一種生物體,或者某些組織切片、單個細胞里具體表達位置非常有用。該技術早應用于60年代末期,由于核酸分子雜交的特異性高,并可定位,因此該技術已被廣泛應用,例如與細胞內RNA進行雜交以觀察該組織細胞中特定基因表達水平。原位雜交能在成分復雜的組織中進行單一細胞的研究而不受同一組織中其他成分的影響,因此對于那些細胞數量少且散在于其他組織中的細胞內DNA或RNA研究更為方便;同時由于原位雜交不需要從組織中提取核酸,對于組織中含量極低的靶序列有極高的敏感性,并可完整地保持組織與細胞的形態,更能準確地反映出組織細胞的相互關系及功能狀態。

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