原位雜交-GISH-貝科新肽(推薦商家)
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武漢貝科新肽科技有限公司
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這一原理對于檢測一個特異的mRNA在某一種生物體,GISH,或者某些組織切片、單個細胞里具體表達位置非常有用。該技術早應用于60年代末期,由于核酸分子雜交的特異性高,植物組織原位雜交,并可定位,因此該技術已被廣泛應用,例如與細胞內RNA進行雜交以觀察該組織細胞中特定基因表達水平。原位雜交能在成分復雜的組織中進行單一細胞的研究而不受同一組織中其他成分的影響,因此對于那些細胞數量少且散在于其他組織中的細胞內DNA或RNA研究更為方便;同時由于原位雜交不需要從組織中提取核酸,對于組織中含量極低的靶序列有極高的敏感性,并可完整地保持組織與細胞的形態,更能準確地反映出組織細胞的相互關系及功能狀態。

原位雜交技術(In situ hybridization,ISH)是分子生物學、組織化學及細胞學相結合而產生的一門新興技術,始于20世紀60年代。1969年美國耶魯大學的Gall等(1969)首先用爪蟾核糖體基因探針與其卵母細胞雜交,將該基因進行定位,與此同時Buongiorno—Nardelli和Amaldi等(1970)相繼利用同位素標記核酸探針進行了細胞或組織的基因定位,從而創造了原位雜交技術。自此以后,原位雜交,由于分子生物學技術的迅猛發展,特別是20世紀70年代末到80年代初,分子、質粒和噬菌體DNA的構建成功,動物組織原位雜交,為原位雜交技術的發展奠定了深厚的技術基礎。

核酸原位雜交可根據其檢測物而分為細胞內原位雜交和組織切片內原位雜交;根據其所用探針及所要檢測核酸的不同又可分為DNA-DNA, RNA-DNA, RNA-RNA雜交。但不論哪種雜交都必須經過組織細胞的固定,預雜交,雜交,沖等一系列洗步驟及自顯影或酶法顯色以顯示雜交結果。
我們在這兒介紹的是整胚原位雜交,不同于一般的在載片上對細胞和組織切片進行探針雜交及檢測的原位雜交,

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