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植物RNA原位雜交技術服務-科銳諾生物科技

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染色體發現距今已有150多年的歷史,染色體檢測被廣泛用于動、植物及人類的細胞遺傳學研究,隨著染色體分技術和分子生物學技術的發展。染色體研究范圍也不斷擴大,特別是用于腫1瘤分子診斷。腫1瘤細胞的染色體變化是一非常普遍的現象,可分為原發和繼發兩類。在腫1瘤形成的生物學基礎方面,原發性的染色體變化與引起腫1瘤的直接原因有關,腫1瘤細胞中可以發現各種形式的染色體畸變,如缺失、重復、易位、重排、單體斷裂及核內復1制等;繼發性變化主要是腫1瘤細胞核型的改變。染色體的檢測對于腫1瘤的診斷、鑒別診斷、生物學行為判別等方面都重要意義。染色體的檢測方法進展很快,檢測的精1確率也不斷提高,

FISH是原位雜交技術大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質標記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末 被發明,現已從實驗室逐步進入臨床診斷領域。基本原理是熒光標記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復性;通過熒光顯微鏡觀察熒光信號可在不改變被分析對象(即維持其原位)的前提下對靶核酸進行分析。DNA熒光標記探針是其中常用的一類核酸探針。利用此探針可對組織、細胞或染色體中的DNA進行染色體及基因水平 的分析。熒光標記探針不對環境構成污染,靈敏度能得到保障,可進行多色觀察分析,因而可同時使用多個探針,縮 短因單個探針分開使用導致的周期過程和技術障礙。

滴加封閉液:37℃30分鐘。甩去多余液體,不洗。

.滴加生物素化鼠抗地1高辛:37℃ 60分鐘或室溫120分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×4次。勿用其它緩沖液和蒸餾水洗滌。

滴加SABC:37℃20分鐘或室溫30分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×3次。勿用其它緩沖液和蒸餾水洗滌。

滴加生物素化過氧化物酶:37℃20分鐘或室溫30分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×4次。

DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒—1ml蒸餾水加顯色劑A,B,C各一滴,植物RNA原位雜交技術服務,混勻,加至標本上。一般顯色20-30分鐘。若無背景出現則可繼續顯色。也可自配DAB顯色劑后顯色。充分水洗。

.蘇1木素復染,充分水洗。

酒精脫水,二甲1苯透明,封片。

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