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武漢科銳諾生物科技有限公司

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分子病理診斷的臨床應(yīng)用將會(huì)進(jìn)一步擴(kuò)展經(jīng)典病理學(xué)診斷的內(nèi)涵,將傳統(tǒng)的形態(tài)診斷外延到腫1瘤發(fā)生易感性、基因與染色體變化、基因路徑與基1因治1療、生物學(xué)行為評(píng)估、對(duì)藥1物治1療反應(yīng)的評(píng)價(jià)、臨床預(yù)后的預(yù)測(cè)等醫(yī)1療全過(guò)程之中。?分子病理學(xué)是與分子生物學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)等學(xué)科相互滲透,在蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子水平上研究疾病病因、發(fā)病機(jī)制、形態(tài)變化及功能損害等方面發(fā)生1發(fā)展規(guī)律的新的分支學(xué)科,對(duì)疾病的病因、發(fā)生1發(fā)展、發(fā)病機(jī)制及形態(tài)變化,從傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)概念深入至分子或基因水平,分子病理已成為腫1瘤病理研究中重要的內(nèi)容和手段。

分子病理學(xué)診斷主要應(yīng)用于以下幾個(gè)方面:1、對(duì)于腫l瘤易感基因的檢測(cè),對(duì)于腫l瘤高危人群的篩檢具有實(shí)用價(jià)值,如檢測(cè)GSTπ基因以判定個(gè)體暴露于致癌物是的致癌危險(xiǎn)性。2、腫l瘤相關(guān)病毒的檢測(cè),如采用原位雜交方法檢測(cè)標(biāo)本中HPV、EBER等病毒。3、疑難腫l瘤的診斷和分類(lèi),尤其在鑒別診斷淋巴細(xì)胞增l生性疾病與淋巴細(xì)胞性腫l瘤上有著強(qiáng)大的特異性和可靠性。4、腫l瘤的個(gè)體化治l療,能夠根據(jù)腫l瘤發(fā)生l發(fā)展不同階段分子水平的特點(diǎn),對(duì)腫l瘤的個(gè)體化和預(yù)見(jiàn)性治l療具有指導(dǎo)意義。5、腫l瘤的預(yù)后判斷,如采用熒光原位雜交技術(shù)(FISH)檢測(cè)HER-2基因在乳l腺l癌病例中的表達(dá)情況,配合術(shù)后治l療,指導(dǎo)臨床用藥選擇。

原位雜交雜交液注意事項(xiàng):

(1)雜交液內(nèi)除含一定濃度的標(biāo)記探針外,還含有較高濃度的鹽類(lèi)、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛血1清白蛋白及載體DNA或RNA等。

(2)雜交液中含有較高濃度的Na+可使雜交率增加,可以減低探針與組織標(biāo)本之間的靜電結(jié)合。甲酰胺可使Tm降低,雜交液中含每1%的甲酰胺可分別使RNA:RNA,RNA:DNA,DNA:DNA的雜交溫度降低0.35℃,染色體原位雜交檢測(cè)服務(wù),0.5℃和0.65℃。,所以雜交液中加入適量的甲酰胺,可避免因雜交溫度過(guò)高而引起的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的破壞以及標(biāo)本的脫落。硫酸葡聚糖能與水結(jié)合,從而減少雜交液的有效容積,提高探針有效濃度,以達(dá)到提高雜交率的目的(尤其對(duì)雙鏈核酸探針)。

在雜交液中加入牛血1清白蛋白及載體DNA或RNA等,都是為了阻斷探針與組織結(jié)構(gòu)成分之間的非特異性結(jié)合,以減低背景。

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