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主營：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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植物組織原位雜交的步驟包括以下幾個(gè)方面：
1. 制備組織樣品：從植物中取出需要研究的組織樣品，如根、莖、葉等。
2. 固定組織樣品：將組織樣品固定在載玻片上，通常使用或乙醇等化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行固定。
3. 處理組織樣品：對(duì)固定的組織樣品進(jìn)行脫水、透明化、脫脂等處理，以便于DNA探針的穿透和結(jié)合。
4. 制備DNA探針：根據(jù)需要研究的基因序列，熒光原位雜交技術(shù)，設(shè)計(jì)并合成DNA探針。DNA探針可以標(biāo)記熒光染料或性同位素，以便于檢測。
5. 雜交DNA探針：將DNA探針與組織樣品進(jìn)行雜交，通常需要在高溫下進(jìn)行，以便于DNA探針與RNA或DNA結(jié)合。
6. 檢測雜交信號(hào)：通過熒光顯微鏡或計(jì)數(shù)器等設(shè)備，檢測DNA探針與RNA或DNA的結(jié)合情況，確定目標(biāo)基因的表達(dá)模式和位置。
植物組織原位雜交是一種重要的分子生物學(xué)技術(shù)，它可以用來研究植物基因的表達(dá)和調(diào)控。該技術(shù)利用DNA探針與目標(biāo)組織中的RNA或DNA結(jié)合，從而確定目標(biāo)基因的表達(dá)模式和位置。本文將介紹植物組織原位雜交的原理、步驟和應(yīng)用。
原理
植物組織原位雜交的原理是利用DNA探針與目標(biāo)組織中的RNA或DNA結(jié)合，從而確定目標(biāo)基因的表達(dá)模式和位置。DNA探針是一段已知序列的DNA分子，可以與目標(biāo)RNA或DNA的互補(bǔ)序列結(jié)合。在組織原位雜交中，DNA探針通常標(biāo)記有熒光染料或性同位素，以便于檢測。
原位雜交技術(shù)（in situhybridization）是以標(biāo)記的核酸分子為探針，在組織細(xì)胞原位檢測特異核酸分子的技術(shù)。使含有特異序列、經(jīng)過標(biāo)記的核酸單鏈即探針，在適宜條件下與組織細(xì)胞中的互補(bǔ)核酸單鏈即靶核酸發(fā)生雜交，再以自顯影或細(xì)胞化學(xué)方法對(duì)標(biāo)記探針進(jìn)行探測，從而在細(xì)胞原位顯示特異的DNA或RNA分子。
可以檢測cRNA、miRNA、LnRNA、DNA。可以各種種屬的標(biāo)本，包括哺乳動(dòng)物、爬行動(dòng)物、菌、植物標(biāo)本。也可以檢測組織芯片。
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第3年
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