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武漢科銳諾生物科技有限公司
主營：外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術(shù)服務
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| 先生： |
分子病理學是與分子生物學、細胞遺傳學等學科相互滲透，在蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子水平上研究疾病病因、發(fā)病機制、形態(tài)變化及功能損害等方面發(fā)生和發(fā)展規(guī)律的新的分支學科，對疾病的病因、發(fā)展、發(fā)病機制及形態(tài)變化，從傳統(tǒng)形態(tài)學概念深入至分子或基因水平，分子病理已成為腫1瘤病理研究中重要的內(nèi)容和手段。①細胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位，可用于基因圖譜，基因表達和基因組進化的研究；
阻斷內(nèi)源性過氧化物酶：滴加3%1甲1醇-H2O2，室溫避光孵育15min，將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。
預雜交：滴加預雜交液，37°C孵育1h。
雜交：傾去預雜交液，滴加含探針has-circ-ST6GALNAC6 probe 雜交液，濃度6ng/ul，恒溫箱37度雜交過夜。
雜交后洗滌：洗去雜交液，2×SSC，37°C 洗10min，1×SSC，37°C洗2×5min，0.5×SSC室溫洗10min。若非特異雜交體較多，可以增加甲酰胺洗滌。
滴加封閉液：滴加封閉血1清（正常兔血1清），室溫30min。
滴加鼠抗地1高辛標記過氧化物酶（anti-DIG-HRP）：傾去封閉液，滴加anti-DIG-HRP。37°C孵育50min，后PBS洗3次×5min。
滴加FITC-TSA：滴加FITC-TSA試劑，避光室溫反應5min。后TBST洗3次×10min，PBS洗1次×5min。
DAPI復染核：切片滴加DAPI染液，分子病理技術(shù)服務，避光孵育8min，沖洗后滴加抗熒光淬滅封片1劑封片。
鏡檢拍照：切片于尼康正置熒光顯微鏡下觀察并采集圖像。（紫外激發(fā)波長330-380nm，發(fā)射波長420nm，發(fā)藍光；FAM(488)綠光激發(fā)波長465-495nm，發(fā)射波長515-555 nm，發(fā)綠光；CY3紅光激發(fā)波長510-560，發(fā)射波長590nm，發(fā)紅光。）
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第4年
