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武漢科銳諾生物科技有限公司

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水稻原位雜交測(cè)試服務(wù)-科銳諾(推薦商家)

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后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液為1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室溫固定 10分鐘。蒸餾水洗滌3次。

原位雜交的預(yù)雜交:濕盒的準(zhǔn)備——干的雜交盒底部加20%甘油20ml以保持濕度。按每張切片20μι加預(yù)雜交液。恒溫箱38-42℃2—4小時(shí)。吸取多余液體,不洗。

雜交——按每張切片20μι雜交液,加在切片上。將原位雜交專1用蓋玻片的保護(hù)膜揭開后,蓋在切片上。恒溫箱38-42℃雜交過夜(根據(jù)雜交情況可以調(diào)節(jié))。

雜交后洗滌:揭掉蓋玻片,37℃左右水溫的2×SSC洗滌5分鐘×2次;37℃0.5×SSC洗滌15分鐘×1次; 37℃0.2×SSC洗滌15分鐘×1次(如果有非特異性染色,水稻原位雜交測(cè)試服務(wù),重復(fù)0.2×SSC洗滌15分鐘×1-2次)。

多彩色熒光原位雜交(multicolorfluorescenceinsituhybridization,mFISH)。它用幾種不同顏色的熒光素單獨(dú)或者混合標(biāo)記的探針進(jìn)行原位雜交,能同時(shí)檢測(cè)多個(gè)基因,擴(kuò)大了FISH技術(shù)的臨床應(yīng)用。FISH技術(shù)目前主要應(yīng)用于染色體和DNA水平上的病理診斷檢測(cè)。染色體FISH主要檢測(cè)染色體易位、缺失、重復(fù)、變異等;DNAFISH主要是檢測(cè)基因突變、擴(kuò)增、易位、缺失。與原位雜交技術(shù)相比,F(xiàn)ISH更加安全、快速,特異性好、定位準(zhǔn)確。

熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,F(xiàn)ISH)是在20世紀(jì)80年代末在性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非性分子細(xì)胞遺傳技術(shù),以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導(dǎo)分子(reporter molecule)結(jié)合,雜交后再通過細(xì)胞化學(xué)過程連接上熒光染料[1,2].FISH的基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標(biāo)記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯(lián)的單與探針分子特異性結(jié)合來檢測(cè)DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對(duì)定量分析.FISH具有安全、快速、靈敏度高、探針能長期保存、能同時(shí)顯示多種顏色等優(yōu)點(diǎn),不但能顯示中期分裂相,還能顯示于間期核.同時(shí)在熒光原位雜交基礎(chǔ)上又發(fā)展了多彩色熒光原位雜交技術(shù)和染色質(zhì)纖維熒光原位雜交技術(shù).

水稻原位雜交測(cè)試服務(wù)-科銳諾(推薦商家)由武漢科銳諾生物科技有限公司提供。武漢科銳諾生物科技有限公司為客戶提供“外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術(shù)服務(wù)”等業(yè)務(wù),公司擁有“科銳諾”等品牌,專注于技術(shù)合作等行業(yè)。,在湖北省武漢市江夏區(qū)神墩四路666號(hào)武漢國英種子A棟1樓的名聲不錯(cuò)。歡迎來電垂詢,聯(lián)系人:王經(jīng)理。

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