

液相色譜柱活化指南:廣州中森檢測新柱使用前處理
新色譜柱如同沉睡的精密儀器,活化是其“喚醒”過程,對確保檢測結果準確性、延長柱子壽命至關重要。以下是廣州中森檢測等專業實驗室遵循的通用活化流程及關鍵注意事項:
?? 活化核心步驟
1. 溫和起始 (低流速、低有機相):
* 連接柱子前,確保系統管路已用合適溶劑充分沖洗。
* 將柱子接入系統,避免連接時產生高壓沖擊。
* 設置流動相為高比例水相/緩沖鹽相(如 95% 水/緩沖液 + 5% 有機溶劑,如甲醇或乙腈)。
* 使用低流速(通常為分析流速的 1/4 - 1/2,如 0.2 - 0.5 mL/min)開始沖洗。持續 15-30 分鐘,浸潤固定相并初步洗去柱內儲存溶劑和潛在雜質。
2. 逐步提升有機相比例:
* 在低流速下,逐步、平緩地增加流動相中有機溶劑的比例(例如每次增加 10-20%)。
* 典型梯度:5% 有機相 → 25% → 50% → 75% → 最終達到 100% 有機溶劑(甲醇或乙腈)。
* 每個梯度水平保持 10-20 分鐘,讓固定相充分適應溶劑環境變化。全程保持低流速。
3. 純有機相沖洗與平衡:
* 達到 100% 有機溶劑后,保持此比例,并將流速逐步提高到分析方法設定的正常流速(如 1.0 mL/min)。
* 用純有機溶劑沖洗 30-60 分鐘,徹底清除生產殘留物、運輸中可能吸附的雜質以及硅膠表面的疏水性污染物。
4. 轉換至起始流動相并平衡:
* 緩慢、平緩地將流動相切換回分析方法設定的起始比例(例如 95% 水相 + 5% 有機相)。避免劇烈切換。
* 在分析方法設定的正常流速下,用起始流動相進行充分平衡。
* 平衡完成的標志:系統壓力穩定(波動 <5%),基線平穩(噪音低、無漂移),保留時間重現性好。通常需要 30 分鐘至數小時,視具體柱子和方法而定。
?? 關鍵注意事項(廣州中森檢測實踐要點)
* 嚴格遵循說明書: 首要原則是參考新色譜柱隨附的說明書!不同廠家、不同填料(C18, C8, HILIC, 離子交換等)的活化要求可能有顯著差異。
* 溶劑兼容性: 確保所用活化溶劑與色譜柱填料兼容。例如,正相柱絕對避免接觸水或高比例水相。
* 緩沖鹽處理: 若分析方法含緩沖鹽,在活化最后階段切換到含鹽流動相前,務必先用高比例水相(不含鹽)過渡沖洗(如 5-10 柱體積),避免鹽在純有機相中析出堵塞柱子。切換到含鹽流動相后需再次充分平衡。
* 壓力監控: 全程密切關注系統壓力。壓力異常升高可能預示堵塞或操作不當,應立即停止檢查。
* 保護柱: 如需安裝保護柱,建議在活化主柱之后安裝,或在活化初期就安裝好一同活化,避免保護柱填料污染新柱。
* 實驗室SOP: 廣州中森檢測等專業實驗室必有嚴格的色譜柱管理標準操作規程 (SOP),操作前務必了解并遵守本實驗室的具體規定。
?? 總結
新色譜柱的活化是液相檢測成功的基礎。通過低流速起始、逐步提升有機相、純有機相徹底沖洗、最后平穩切換至分析方法條件并充分平衡這一標準化流程,能有效去除雜質、潤濕固定相、穩定系統性能。廣州中森檢測等機構將此流程納入嚴格的質量控制體系,確保每一根新柱在投入使用前都達到最佳狀態,為檢測數據的準確可靠保駕護航。切記:說明書和實驗室SOP是最高指南!
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